U skladu s Kristovim riječima: „Pođite dakle i učinite mojim učenicima sve narode… I evo, ja sam s vama u sve dane ‒ do svršetka svijeta“ (Mt 28, 19-20), dio je Družbine karizme i misijska djelatnost.
Družba, poslušna volji Oca nebeskoga koji želi spasenje svih ljudi (1 Tim 2, 4), surađuje od svojih početaka u misijskom radu Crkve.
Nedugo nakon svojeg osamostaljenja Družba se na poticaj tadašnjeg Zbora za širenje vjere uključila u misijsko djelovanje Crkve, pa prve sestre milosrdnice u misije odlaze na područje Turskog Carstva, najprije na područje današnje Bosne i Hercegovine (1871.), a potom i u Rumeliju (danas europski dio Turske, 1881.), Albaniju (1890.) i Makedoniju (1903.).
Tridesetih godina 20. stoljeća prve sestre odlaze u Argentinu, prvotno s namjerom da se uključe u pastoral iseljenih Hrvata, a potom se spremno prihvaćaju i misijskoga rada u siromašnim krajevima Argentine, Paragvaja i Urugvaja.
Najnoviji misijski iskorak Družba čini 2011. kada otvara misijsku postaju u Bumi, na dalekim Salomonskim Otocima. U Bumi danas djeluje šest sestara od kojih su dvije domaće sestre rodom s otoka Malaite.
U Bumi su sestre razvile raznovrsnu djelatnost radeći u mjesnoj ambulanti, školi, održavajući tečajeve kuhanja, krojenja i šivanja, obilazeći bolesnike po kućama, katehizirajući i radeći s djecom i mladima. Otvorile su i Edukacijski centar svete Lujze de Marillac u kojem se redovito održavaju različiti seminari i duhovne vježbe za svećenike, katehiste